贵州省省长基金(C-314)
- 作品数：2 被引量：29H指数：2
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- 钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大的抑制作用被引量：19
- 2010年
- 目的研究钩藤碱(Rhy)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的抑制作用及其可能的作用机制。方法应用胰酶消化法制备新生大鼠原代心肌细胞,培养3d后,随机分为正常对照组、模型组(AngⅡ0.1μmol·L-1)、Rhy1,3和10μmol·L-1组。心肌细胞加入Rhy0,1,3和10μmol·L-1,30min后再加入AngⅡ0.1μmol·L-1作用48h。采用LeicaQwinV3图像分析系统测量心肌细胞的表面积,BCA法测定总蛋白质含量,激光共聚焦显微镜检测心肌细胞[Ca2+]i,比色法测定细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,实时荧光定量PCR检测心房利钠因子(ANF)、心肌细胞钙调神经磷酸酶(CaN)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的表达。结果与正常对照组比较,AngⅡ0.1μmol·L-1明显诱导心肌细胞肥大,心肌细胞表面积由每个细胞(167±28)μm2增加至(462±42)μm2(n=6,P<0.01),总蛋白质含量由平均每个细胞(211±10)pg增加至(299±12)pg(n=6,P<0.01),ANFmRNA表达亦增加,由48±4增加至227±9(n=6,P<0.01);心肌细胞[Ca2+]i荧光强度由93±18增加至149±9(n=6,P<0.01),NOS活性和NO含量分别由(0.76±0.03)kU·L-1和(1.36±0.10)μmol·L-1降低至(0.45±0.09)kU·L-1和(0.73±0.04)μmol·L-1(n=6,P<0.01);另外,NOSmRNA表达降低,CaNmRNA和ERK2mRNA表达增加(P<0.01)。与模型组比较,Rhy1,3和10μmol·L-1可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,对表面积的抑制率分别为50%,57%和61%(P<0.05,P<0.01),对蛋白质含量的抑制率分别为7%,10%和23%(P<0.05,P<0.01),对ANFmRNA表达的抑制率为42%,56%和66%(P<0.01);明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞[Ca2+]i增加,抑制率分别为15%,20%和28%(P<0.01);另外,可增加NOS活性,促进NO释放,并显著增加eNOSmRNA表达,降低CaNmRNA和ERK2mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论 Rhy可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与促进NO释放、抑制CaNmRNA和ERK2mRNA表达有关。
- 何娜孙安盛吴芹黄燮南石京山
- 关键词：钩藤碱肥大钙调神经磷酸酶细胞外信号调节激酶
- 钩藤碱对AngⅡ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用被引量：14
- 2008年
- 目的研究钩藤碱（rhynchophylline，Rhy）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）增殖的抑制作用及机制。方法采用细胞计数法和MTT比色法检测Rhy对AngⅡ诱导大鼠VSMCs增殖的影响；测定Rhy对AngⅡ作用的VSMCs上清液一氧化氮（nitric oxide，NO）含量和一氧化氮合酶（constitutive nitric oxide synthase，cNOS）活性的影响；实时定量聚合酶链式反应（RT—PCR）检测VSMCs中c—myc、NOS和高血压相关基因-1（hypertension relatedgene-1，rHRG-1）mRNA的表达.结果Rhy（3×10^-6～3×10＆-7mol·L^-1）呈浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导大鼠VSMCs的增殖，升高细胞上清液中N0的含量和NOS活性，降低c—myc mRNA，升高rHRG-1和NOS mRNA的表达.结论Rhy明显抑制AngⅡ诱导大鼠VSMCs的增殖，机制可能与增加VSMCs中NOS活性并促进NO的合成和释放以及下调c—myc、上调NOS和rHRG-1 mRNA的表达有关。
- 李艳菊孙安盛余丽梅吴芹
- 关键词：钩藤碱MRNANOSMRNA
