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LPS对大鼠肺微血管内皮细胞SSeCKS的表达影响: 2007年; 目的研究细菌脂多糖(LPS)对大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular en- dothelial cell,RPMVEC)Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSeCKS)表达和细胞内定位的影响,探讨SSeCKS参与细胞骨架结构改变的可能机制。方法用植块培养法体外培养大鼠肺微血管内皮细胞,用抗大鼠CD31抗体进行细胞鉴定。LPS刺激体外培养的RPMVEC,用定量PCR、免疫印迹方法检测LPS刺激RPMVEC不同时间SSeCKS mRNA和蛋白的表达情况;用0.05μmol/L蛋白激酶C(PKC)抑制剂(Calphostin c)预处理RPMVEC 30 min后再用LPS刺激6 h,免疫荧光细胞化学法观察Calphostin C埘LPS诱导SSeCKS与纤维状肌动蛋白(filamentous-actin,F-actin)细胞内定位和结构改变的影响。结果定量PCR结果显示LPS刺激RPMVEC 1 h后SSeCKS表达水平达到最高, Western blot结果与定量PCR结果相一致,同时,LPS以时间依赖的方式诱导SSeCKS磷酸水平增加。免疫荧光结果显示LPS刺激后,F-actin发生重构,细胞内形成应力纤维,SSeCKS向核周、细胞膜纤维、板状伪足末端聚集;Calphostin C部分抑制LPS对内皮细胞F-actin和SSeCKS细胞内定位改变的影响。结论LPS能够诱导内皮细胞SSeCKS表达增加和细胞内定位改变,PKC参与LPS诱导内皮细胞F-ac- tin的重构和SSeCKS重新分布;提示SSeCKS可能与LPS诱导内皮细胞F-actin的重构有关。; 刘海鸥沈爱国孙琳琳肖峰周丹程纯; 关键词：内皮细胞脂多糖

β-1，4-GalTI在Lewis大鼠急性EAE模型中的初步研究: 目的:研究 Beta-1,4半乳糖基转移酶(β-1,4-GalT-I)在急性 EAE 发病过程中脊髓腰膨大中的变化,探讨其在 MS 发病过程中的作用机制。方法:(1)Lewis 大鼠爪底皮下注射豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐...; 高英沈爱国; 关键词：EAE LEWIS

β-1,4-半乳糖基转移酶V对胶质细胞瘤细胞SHG-44粘附的影响被引量：1: 2004年; 目的 :研究 β 1,4 半乳糖基转移酶V(β 1,4 GalTV)对星形胶质瘤细胞株粘附能力的影响及其与细胞恶性行为的关系。方法 :将转染正义、反义 β 1,4 GalTV和空载体的SHG 4 4细胞株接种于包被有纤连蛋白 (FN)或层连蛋白 (LN)的板上 ,观察细胞粘附力的变化。采用WesternBlot的方法检测整合蛋白 β1表达变化及局部粘着斑激酶 (FAK)的蛋白水平和FAK的酪氨酸磷酸化水平。结果 :在FN和LN包被的板上 ,与转空载体的SHG 4 4细胞株相比 ,转正义 β 1,4 GalTV比转反义 β 1,4 GalTV的细胞在纤连蛋白和层连蛋白上的粘附能力增高 ,β1蛋白表达水平升高 ,FAK及其酪氨酸磷酸化水平增强。结论 :β 1,4 GalTV对SHG 4 4细胞的粘附能力确有影响 ,提示 β 1,4; 程纯严美娟沈爱国邵晓轶顾建新; 关键词：SHG-44细胞粘附能力胶质细胞瘤层连蛋白

β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究: 2003年; 为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在; 沈爱国何江虹丁斐朱敏王汉洲顾建新; 关键词：Β-1,4-半乳糖基转移酶亚细胞结构肝癌细胞

大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS的表达变化被引量：3: 2007年; 为了探讨大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C底物)在神经中的表达变化及其意义,本研究制备了成年SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经夹伤后SSeCKS表达的时空变化。Western blotting结果显示:大鼠坐骨神经夹伤后,SSeCKS的表达迅速升高,伤后6h即达到高峰,之后逐渐下降。免疫组织化学染色结果表明SSeCKS在神经夹伤两端高表达,以近端明显,呈簇状聚集。夹伤远端表达较近端稍低。远离夹伤处及相应对侧,SSeCKS的表达水平有所下降且分布较为均一。免疫荧光组织化学双标记结果显示:夹伤两端SSeCKS与S100和NF200的共存不明显,但可见部分SSeCKS与GAP43双标纤维。本研究提示大鼠坐骨神经夹伤可引起SSeCKS的表达变化,该变化可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导并与损伤后神经的再生及功能修复有关。; 陈莉秦婧沈爱国刘海鸥牛淑琼高尚峰史淑贤; 关键词：SSECKS 免疫组织化学 WESTERN BLOTTING

β-1，4-GalT-I在大鼠脊髓损伤中的初步研究: 目的:观察β-1,4-半乳糖基转移酶 I(β1,4 galactosyltransferase I、β-1,4-GalT-I)在大鼠脊髓损伤模型中的表达情况,探讨其在中枢神经重要组成部分-脊髓的发育、损伤与修复过程中的生...; 沈爱国牛淑琼程纯; 关键词：大鼠脊髓损伤半乳糖基转移酶

Dexamethasone inhibits proliferation and stimulates SSeCKS expression in C6 rat glioma cell line: Although there is ample evidence that dexamethasone(Dex)have an antiproliferative effect on many cell types,th...; 程纯; 关键词：DEXAMETHASONE SSECKS

p27^kipl及相关分子Skp2在U937细胞增殖过程中的表达变化及相互关系被引量：1: 2007年; p27^kipl为CIP／KIP家族的主要成员，对细胞周期起负调节作用。由于p27^kipl的蛋白水平主要受到S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase—associated protein 2，Skp2）介导的细胞周期依赖性、底物特异性的泛素-蛋白酶体途径调节，因此p27^kipl降解水平的调节对其正常生物学功能的发挥至关重要。Skp2为人类F-box蛋白家族成员，介导p27^kipl的多聚泛素化及随后的蛋白水解。研究发现Skp2在人类多种肿瘤中都有表达，并且与肿瘤组织的分化程度及预后相关。我们旨在对Skp2参与介导的p27^kipl的泛素-蛋白酶体途径降解与p27^kipl的稳定性之间的关系进行探讨，运用目前比较公认的血清饥饿合并释放方法同步化处理U937细胞，结合Western blot、免疫荧光双标记及激光共聚焦技术检测在不同生长状态下p27^kipl、Skp2及其他细胞周期相关分子在U937细胞内的表达和定位情况。; 王熵婵陆建新沈爱国张冬梅邵晓轶何松程纯; 关键词：P27^KIPL SKP2 相关分子增殖过程泛素-蛋白酶体途径

P27与Skp2在大鼠脑损伤过程中的关系:参与了损伤后的胶质增生: 目的:p27,作为细胞周期抑制因子家族的一员,在中枢神经系统发育过程中发挥着至关重要的作用。同时,Skp2作为F-box家族的一员,它在肿瘤细胞以及多种机体细胞中参与介导了p27的泛素化蛋白酶体降解,使得细胞周期能够顺利...; 刘永华沈爱国程纯; 关键词：脑损伤 P27 SKP2 胶质细胞增生

Thr187磷酸化p27^kip1、Skp2在肝细胞癌中的表达及其意义被引量：2: 2007年; 本研究检测了Thr187磷酸化p27（P—p27Thr187）、Skp2及p27在HCC中的表达情况并结合临床资料进行分析，从p27分子磷酸化失活的新角度进一步研究HCC发病的分子机制，探讨其中的临床病理意义。; 王酉陈莉陆牡丹李鹏崔小鹏秦军沈爱国; 关键词：肝细胞癌增殖细胞核抗原临床病理意义

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江苏省高校自然科学研究项目(03KJB180109)

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