代兴亮
- 作品数：35 被引量：58H指数：5
- 供职机构：苏州大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶质瘤干祖细胞与巨噬细胞的社会活动：细胞连接、融合及胞释被引量：3
- 2015年
- 目的 通过分析免疫细胞社会中的肿瘤细胞与宿主巨噬细胞之间的关系,探寻肿瘤细胞社会中打破免疫平衡的大事件.方法 共培养红绿双色荧光示踪的胶质瘤干/祖细胞与宿主巨噬细胞,置于活细胞工作站实时摄影缩时成像并视频分析目标细胞的社会行为.结果 相关细胞实时动态连续观察发现：（1）细胞间传递信息的连接管道的6种类型.（2）2个活跃细胞相互作用后变成1个细胞,即细胞融合;已融合的细胞与另一个细胞再融合.（3）融合细胞的命运有对称分裂产生子细胞和瞬间凋亡两种.（4）存在一个细胞进入另一细胞内后胞释现象.结论 胶质瘤干/祖细胞与宿主巨噬细胞间连接方式、融合、分裂及胞释过程,可作为胶质瘤干/祖细胞诱导宿主巨噬细胞恶变的细胞行为学依据,对进一步理解肿瘤细胞社会成员间的复杂关系有重要意义.
- 王林代兴亮王海洋王中勇王爱东董军兰青黄强
- 关键词：胶质瘤干细胞细胞融合
- 人脑胶质瘤干祖细胞-绿色荧光裸小鼠皮下移植瘤SU3-NC/GFP-1模型建立被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人脑胶质瘤干祖细胞-绿色荧光裸小鼠皮下移植瘤模型的建立。方法将人脑胶质瘤干祖细胞株SU3接种于NC-C57BL/6J荧光裸小鼠右前肢腋下,定期测肿瘤大小,取移植瘤组织块持续传代,并做常规病理、免疫组化染色和绿色荧光蛋白(GFP)检测。结果移植瘤连续传至10代,100%致瘤率。肿瘤晚期都有肉眼可见的肿瘤表面皮肤溃疡性结痂,常规病理符合恶性肿瘤特征,分子免疫病理缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CD34、TNF、Ki67非均一性表达于相关区域或相关细胞,在470nm激发光下可见移植瘤间质存在一定数量的GFP细胞,以及在坏死区域内的GFP细胞CD68+和CD11b+。结论成功建立人脑胶质瘤干祖细胞-绿色荧光裸小鼠皮下移植瘤模型。
- 陆朝晖戴纯刚刘兵马笑宇何林明张金石陈延明代兴亮贾敬云王爱东董军兰青黄强
- 人胶质瘤细胞系 SU3与小鼠巨噬细胞共培养产生的融合细胞具有恶性转化的特点被引量：2
- 2014年
- 目的：通过胶质瘤细胞（SU3）与巨噬细胞（macrophage，Mφ）共培养来证明胶质瘤间质中的Mφ恶性转化是SU3与Mφ融合导致的。方法将转有红色荧光蛋白基因（ RFP）的SU3与表达增强型绿色荧光蛋白（ EGFP ）的小鼠腹腔冲洗出的Mφ进行体外共培养；用单克隆方法建立表达RFP＋/GFP＋双色荧光（黄色）的细胞系，然后进行癌细胞相关表型分析、致瘤性试验、鼠巨噬细胞标记物检测。结果（1）这两种细胞共培养后，细胞群中出现为数不多的黄色细胞，并成功单克隆到C3、C4和C12三株细胞。（2） C12继续传代培养后分化出RFP＋、EGFP＋和RFP＋/EGFP＋三种类型细胞，但随着传代次数增多，EGFP＋（绿色）细胞比例逐渐升高而成为主体，RFP＋/EGFP＋（黄色）细胞比例逐渐下降并维持在较低水平，而RFP＋（红色）细胞基本消失。（3） C12细胞株中的EGFP＋细胞具有以下特点：生长接触抑制消失、增殖速度快、染色体异倍体等癌细胞特征；在裸小鼠体内具有高致瘤率（5/5）；表达巨噬细胞特异性标记CD68，大部分染色体为鼠端着丝粒。结论本实验用体外模型证明我们先前在实体瘤中观察到的人脑胶质瘤细胞诱导宿主巨噬细胞恶性转化是通过细胞融合途径实现的。本实验与我们先前从荷瘤鼠实体瘤组织中克隆到恶性转化的巨噬细胞株（ ihCTC）的体内实验一起，相互印证了肿瘤微环境中宿主巨噬细胞恶性转化是客观存在的。宿主细胞与肿瘤细胞融合后发生的恶变既为肿瘤恶性进展和肿瘤异质性增添了新的内涵；又为肿瘤靶向治疗增加了新的靶标。
- 王林代兴亮芮琴王海洋王爱东董军兰青黄强
- 关键词：胶质瘤干细胞巨噬细胞细胞癌变
- 胶质瘤干祖细胞体外诱导恶性转化的树突状细胞株SU3-ihDCTC的建立及其特征分析被引量：2
- 2015年
- 目的探讨胶质瘤干祖细胞体外诱导恶性转化的树突状细胞株的建立及其特征分析。方法取表达绿色荧光蛋白（EGFP）的小鼠骨髓腔冲洗细胞，用树突状细胞诱导培养方法，与表达红色荧光蛋白（RFP）的人胶质瘤干祖细胞SU3共培养，从单克隆增殖能力强的EGFP（＋）永生化细胞中随机选取1株检测相关分子标志物，行染色体分析和致瘤试验。结果被鉴定分析的1株永生化EGFP（＋）细胞形态为树突状，Dc标志蛋白CD11c、CD80、信号调节蛋白α（SIRP-α）均高表达，此外表达宿主鼠源性β-肌动蛋白和EGFP；且兼具高增殖、侵袭和移植致癌的潜能；染色体核型为异倍体。结论在体外共培养系统中，成功地建立了1株被胶质瘤干祖细胞SU3诱导恶性转化的永生化树突状细胞株，有望作为工具细胞进一步用于非可控性炎症细胞的相关研究。
- 王德林代兴亮费喜峰王海洋陈金生王麒龙芮琴王之敏王爱东董军兰青黄强
- 关键词：胶质瘤干细胞恶性转化
- 绿色裸小鼠脑组织中增强型绿色荧光蛋白表达分析被引量：1
- 2015年
- 目的分析增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因裸小鼠（绿色裸小鼠）脑组织中EGFP的表达情况，为绿色裸小鼠的脑内移植应用提供依据。方法以本实验室自建的绿色裸小鼠FoxnlTnu．B6-CAG-EGFP／SU为实验对象，采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析小鼠主要器官组织／细胞和脑不同部位组织中EGFPmRNA表达水平，通过荧光显微镜观察小鼠全身主要器官组织和全脑不同层面组织中绿色荧光强度．应用荧光分光光度计定量分析、免疫组化染色定性观察小鼠脑不同部位组织中EGFP蛋白含量及阳性细胞的表达。结果半定量RT-PCR结果显示，绿色裸小鼠主要器官组织／细胞均不同程度表达EGFP。荧光显微镜下观察到脑不同层面组织均能显示绿色荧光，且亮度呈现部位差异，其中小脑皮层、海马、嗅球等部位荧光较亮。荧光定量PCR和荧光分光光度计定量分析表明，与大脑皮质相比，小脑皮层、海马和嗅球等组织EGFPmRNA和蛋白的表达水平较高。免疫组化染色显示，小脑浦肯野细胞、海马锥体细胞、嗅球颗粒细胞等呈现EGFP强阳性反应。结论绿色裸小鼠脑组织均不同程度表达EGFP，其中小脑皮层、海马和嗅球等部位表达较高．因此脑也适合做脑内移植实验研究。
- 芮琴王爱东陆朝晖刘兵戴纯刚代兴亮王麒龙陈金生董军兰青黄强
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白脑组织
- 胶质母细胞瘤干细胞原代培养方法
- 本发明提供一种胶质母细胞瘤干细胞的原代培养方法，所述方法包括以下步骤：GSCs原代培养、GSCs传代培养、GSCs冻存。本方法利用GSCs悬浮、成球性生长的特点，通过显微镜下挑选单个细胞克隆化培养。所获得的细胞表达不同干...
- 董军施佳王海洋代兴亮
- 文献传递
- 脑微血管模型
- 本实用新型公开了一种结合3D生物打印和静电纺丝复合技术制造的脑微血管模型，其包括3D生物打印的内皮细胞层、静电纺丝的可降解(聚乳酸)PLA基膜层、喷雾定植的周细胞层和3D生物打印的星形胶质细胞层。内皮细胞层位于血管模型的...
- 兰青代兴亮
- 文献传递
- 人工血管的培养和功能检测装置
- 本实用新型公开了人工血管的培养和功能检测装置，其包括储液瓶、推进泵、血管灌流柱、旋转支架、旋转马达和废液收集瓶，所述储液瓶通过第一连接管与血管灌流柱的入口端相连通，所述推进泵设于所述第一连接管上；所述血管灌流柱用于放置待...
- 兰青代兴亮
- 文献传递
- 双色荧光示踪裸小鼠模型用于脑胶质瘤组织重构的研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨双色荧光示踪裸小鼠模型用于脑胶质瘤组织重构研究的实用价值。方法将转染红色荧光蛋白基因（RFP）的SU3、U87一MG和用亲脂性碳青染料（CM-DiI）染色的c6胶质瘤细胞6．7×10^9/L，借助立体定向仪接种于自家培育的表达绿色荧光蛋白（GFP）近交系裸小鼠脑内，建立RFP/GFP双色荧光示踪的肿瘤模型，分析示踪效果。结果SU3、U87-MG和C6转染或染色成功的比例接近100％，这些细胞原位移植成功率为100％（30/30）；移植瘤组织重构是在侵袭于脑实质、脑室、脑血管的肿瘤细胞诱导或与宿主细胞融合后发生的。结论在肿瘤组织重构研究中，双色荧光示踪模型对区别肿瘤细胞与宿主细胞之间发生的组织细胞学变化起独特作用。
- 代兴亮陆朝晖王爱东兰青董军黄强
- 关键词：肿瘤微环境
- 结合生物打印和静电纺丝技术制造人工血管的装置
- 本发明公开了结合生物打印和静电纺丝技术制造人工血管的装置，其包括材料释放单元、旋转接收单元、水平移动平台、垂直移动平台、高压电源和控制单元。旋转接收单元位于材料释放单元的下方，旋转接收单元包括旋转电机和接收杆，旋转电机能...
- 兰青代兴亮
- 文献传递
