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黄俊琼: 作品数：52 被引量：157H指数：8; 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>; 发文基金：贵州省优秀科技教育人才省长资金项目国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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IL-31对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549表达CCL2的影响被引量：4: 2015年; 目的通过体外实验研究IL-31对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549表达趋化因子C-C趋化因子配体2(CCL2)的影响,探讨IL-31在支气管哮喘气道炎症中的作用。方法体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,用不同浓度(10、50、100 ng/m L)IL-31作用A549细胞、相同浓度(10 ng/m L)IL-31作用A549细胞不同时间(12、24、36 h),收集细胞,提取细胞总RNA,荧光定量PCR法分析趋化因子CCL2 m RNA的表达情况。结果不同浓度IL-31作用于A549细胞后,趋化因子CCL2的表达较正常未处理组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);10 ng/m L IL-31作用A549细胞后,不同时间段CCL2的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-31作用于肺泡Ⅱ型上皮细胞A549后,趋化因子CCL2的表达明显增高,表明IL-31可能诱导肺组织细胞分泌趋化因子参与哮喘气道炎症过程。; 高婧杜青波谭艳芳岳欢黄俊琼; 关键词：趋化因子CCL2 白细胞介素类气管炎

负载核糖体蛋白L8的树突状细胞对黑色素瘤的抑制作用被引量：1: 2014年; 背景与目的:研究发现核糖体蛋白L8(ribosomal protein L8,RPL8)在黑色素瘤中表达能激活黑色素瘤患者外周血单个核细胞增殖并产生白细胞介素2,提示RPL8可能参与抗肿瘤免疫应答,有望成为抗肿瘤治疗的靶点。本研究通过RPL8蛋白负载树突状细胞(dentritic cell,DC),探讨负载RPL8蛋白的DC对黑色素瘤的免疫效应。方法:原核表达RPL8蛋白,纯化后致敏小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪检测DC表面标志,MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞对小鼠黑色素瘤细胞的杀伤作用;负载RPL8蛋白DC免疫治疗小鼠后,观察肿瘤体积变化及小鼠生存时间。结果:纯化蛋白经蛋白质印迹法(Western blot)分析见约28×103大小的特异性条带;DC经RPL8及细菌脂多糖(Lipoplysaccharide,LPS)诱导成熟后细胞表面CD11c、CD80、MHC-Ⅰ类、MHC-Ⅱ类分子表达增高,能激活T淋巴细胞,对B16细胞有抑制作用,RPL8-DC组的抑制率在效靶比为30∶1时高达70%,较PBS组和DC组明显增高;负载RPL8蛋白DC免疫治疗小鼠后,肿瘤体积缩小,小鼠的生存期明显延长。结论:负载RPL8的DC对黑色素瘤有生长抑制作用。; 李燕尹令丝岳欢黄俊琼胡永林; 关键词：树突状细胞黑色素瘤免疫治疗 RIBOSOMAL PROTEIN

ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响被引量：11: 2008年; 目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。; 黄俊琼孙万邦张海峰杨吉成; 关键词：ING4 AD-ING4 P21

人IL-10真核表达载体构建及其酵母表达和活性鉴定: Interleukin-10(白细胞介素10,IL-10)是美国DNAX研究所的Fiorentino等发现的一种细胞因子。hIL-10可由人体多种细胞产生,具有免疫刺激和免疫抑制双向调节作用,是人体免疫系统的中枢免疫分子...; 陈富超孙万邦封建凯杜联峰黄俊琼罗军敏宋明英; 关键词：酵母表达活性鉴定真核表达载体构建 IL-10; 文献传递

重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化被引量：16: 2010年; 构建重组hIL-10真核表达载体,探索在毕赤酵母中的表达,为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA,经EcoRI/XbaI双酶切后,将其亚克隆至同样双酶切的载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-hIL-10;电转化法,将其转入毕赤酵母SMD1168,甲醇诱导Mut+型转化子基因表达;对目的蛋白进行检测及纯化。扩增出了目的基因hIL-10cDNA,重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确;表达产物经SDS-PAGE分析在42.0kD处可见较浓染条带,Westernblotting分析可见特异条带;ELISA检测72h上清液中目的蛋白浓度可达1.973mg/L;纯化后目的蛋白纯度达67.0%。实现了重组hIL-10在毕赤酵母SMD1168中的成功表达和初步纯化。; 封建凯孙万邦陈富超黄俊琼罗军敏杜联峰姚新生王胜香; 关键词：HIL-10 质粒构建毕赤酵母基因表达

IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立被引量：3: 2014年; 目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试剂盒,并对自制试剂盒进行评价。结果:获得了两株稳定产生抗IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG3,抗体特异性好,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106。试剂盒检测灵敏度为5.726 pg/ml,检测IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,为阴性,靶抗原IL-31的检测结果为阳性(P/N值=13.76);自制试剂盒检测特应性皮炎血清IL-31水平为(532.83±90.39)pg/ml,对照组血清IL-31水平为(103.31±19.17)pg/ml,皮炎组明显高于对照组,有显著性差异(P<0.001)。结论:成功制备了抗IL-31单克隆抗体,建立的ELISA试剂盒可用于临床检测IL-31。; 董革辉魏培黄俊琼杜青波岳欢杜文胜谭艳芳孙万邦; 关键词：IL-31 单克隆抗体

空肠弯曲菌PEB1重组蛋白的表达及单克隆抗体的制备: 2009年; 目的表达CJ PEB1重组蛋白,制备并鉴定CJ PEB1蛋白的单克隆抗体。方法诱导培养工程菌E.co-li BL21(DE3)表达CJ PEB1重组蛋白,以PEB1蛋白溶液与等体积的佐剂完全乳化作为免疫原常规免疫BALB/C小鼠,制备单克隆抗体。无菌取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,建立杂交瘤细胞株。将建株的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔诱生腹水制备抗体,应用间接ELISA法和双向琼脂扩散试验检测腹水中抗体的效价,应用Western-blot和玻片凝集试验检测抗体的特异性。结果得到高纯度的CJ PEB1重组蛋白,蛋白质分子量大小与预计的理论值相符。获得两株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株杂交瘤细胞诱生的腹水,经间接ELISA法检测,腹水中的抗体效价分别为8×104和5×104,经双向琼脂扩散试验检测效价均为1∶16。通过Western-blot鉴定,两株杂交瘤细胞分泌的抗体均与PEB1蛋白特异性地结合;其诱生的腹水与CJ菌液混合出现凝集现象,而与大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等菌液混合均未出现凝集现象。结论成功建立了两株稳定分泌抗CJ PEB1重组蛋白抗体的杂交瘤细胞株并制备了抗CJ PEB1蛋白的单克隆抗体,为今后研究多种检测CJ的方法创造了条件。; 任思坡孙万邦杜联峰余妍黄俊琼罗军敏; 关键词：空肠弯曲菌单克隆抗体杂交瘤细胞

系统性红斑狼疮患者外周血IL-31水平与自身抗体的关系研究被引量：4: 2019年; 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆白细胞介素(IL)-31、IL-6水平,探讨IL-31水平和自身抗体的关系。方法选取SLE患者42例和健康体检者25例,采用ELISA检测血浆IL-31水平,电化学发光法测定血浆IL-6水平,间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)水平,免疫印迹法检测自身抗体[抗双链DNA抗体、抗Sm抗体、抗干燥综合征A抗体、抗干燥综合征B抗体、抗核糖体P蛋白抗体、抗干燥综合征(Ro-52)抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗拓扑异构酶抗体、抗着丝点抗体、抗着丝点B抗体]。结果SLE组IL-31和IL-6水平明显高于健康对照组(P<0.05),SLE患者血浆IL-31水平与IL-6无明显相关性(P>0.05);抗Sm抗体阳性组和阴性组、抗Ro-52抗体阳性组和阴性组、抗RNP抗体阳性组和阴性组各组间的IL-31水平差异均有统计学意义(P<0.05)。结论IL-31可能参与SLE发病,患者外周血IL-31和自身抗体水平检测有助于SLE的诊断。; 石渝何应中钱媛伍小雪苟晓琴黄俊琼; 关键词：系统性红斑狼疮白细胞介素-6 自身抗体

重组人白细胞介素-31表达条件的优化被引量：1: 2008年; 目的优化重组人白细胞介素-31(rhIL-31)的表达条件。方法以不同浓度IPTG、不同诱导时间、不同诱导温度对含有pET32a/rhIL-31的工程菌E.coliBL21(DE3)进行诱导表达,用SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果诱导时间为5h,IPTG浓度为1.5mmol/L,诱导温度为37℃时,rhIL-31的表达量最高。结论已初步优化了重组蛋白rhIL-31的表达条件。; 余妍孙万邦黄俊琼曹雪梅郑静魏培; 关键词：重组蛋白

28例子宫内膜癌患者sIL-2R和T淋巴细胞亚群检测报告: 2000年; 黄俊琼; 关键词：子宫内膜肿瘤免疫功能 SIL-2R T淋巴细胞亚群

黄俊琼

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