左其生
- 作品数：65 被引量：94H指数：6
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- 脂代谢通路对鸡雄性生殖细胞分化的调控机制的研究
- [目的]探索家鸡雄性生殖细胞分化过程中脂代谢相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据.[方法]采用流式细胞分选法获得纯度较高的胚胎干细胞(embryonicstem cell,ESC)、原始生殖细胞...
- 左其生张蕾连超肖天荣王颖洁汤贝贝王飞纪艳芹路镇宇赵瑞峰张文慧张亚妮李碧春
- 关键词：RNA-SEQ雄性生殖细胞视黄酸脂代谢
- 山羊iPS细胞诱导及培养体系的优化
- 2014年
- 为了高效、持续的诱导获得并培养山羊诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS),本研究从饲养层和培养液方面进行优化。将分离获得3代以内的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)、山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblast,GEF)用丝裂霉素C处理后,分别按1×105 mL-1 MEF、1×105mL-1 GEF、5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的密度接种,以高糖DMEM+20%胎牛血清(FBS)和KnockoutDMEM+20%血清替代物(KSR)为培养液,研究不同饲养层种类和培养液对山羊iPS细胞获得和培养的影响。结果显示,山羊iPS细胞在接种密度为5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的饲养层上,使用KnockoutDMEM+20%KSR组合的培养液,山羊iPS细胞的诱导效率以及消化传代后的克隆形成率均极显著高于其他5组(P<0.01)。对该组培养的山羊iPS细胞进行碱性磷酸酶(AKP)染色呈阳性;Oct4、SSEA-1、Tra-1-60、Tra-1-81免疫荧光检测呈阳性;RT-PCR检测有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog基因的表达;体外能分化形成类胚体。结果表明,将细胞接种在密度为5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的饲养层上,使用KnockoutDMEM+20%KSR的培养液更适合山羊iPS细胞的获得和培养。本试验为山羊iPS细胞的体外研究、临床试验、动物基因组修饰和山羊胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES)的建系奠定基础。
- 邱峰龙左其生李东李伟陈庭锋韦光辉李碧春
- 关键词：饲养层培养液IPS细胞山羊
- 鸡性别分化候选基因功能的研究
- 引言性别分化一直以来都是遗传学、发育生物学和畜牧学等多领域的研究热点,尤其是动物的性别与某些经济性状有着直接或间接的关系,了解和掌握性别分化机制具有重要的经济意义.目前鸟类关于性别分化方面的研究鲜有报道,禽类的性别分化机...
- 靳锴左其生张亚妮李碧春
- 关键词：性别分化基因表达高通量测序
- HSD3B2通过甾类激素合成通路调控鸡ESCs 向雄性生殖细胞分化
- 精原干细胞可以替代胚胎干细胞进行基因治疗和遗传操作而不涉及伦理道德,目前被广泛的应用和研究,但是对精原干细胞形成过程中具体的调控方式却少有研究.
目的：本研究旨在探索甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的...
- 张晨王曼何娜娜汪怡临赵瑞丰余昕健金晶左其生张亚妮李碧春
- 关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞细胞分化甾类激素
- 鸡蛋开窗法对嵌合体鸡制备效率的影响
- 2015年
- 将受体种蛋分为3组,分别经换壳法、钝端开窗法和赤道面开窗后,比较3种开窗方法对孵化率的影响;分离培养鸡胚胎干细胞(ESCs),体外培养传代后用线性化的质粒p EGFP-N1转染鸡ESCs,比较显微注射时3种不同的处理方法对孵化率的影响;对获得的嵌合体鸡分别提取血液和组织DNA后进行PCR检测。结果表明:赤道面开窗法的孵化率显著高于换壳法和钝端开窗法(P<0.01);开窗后,显微注射经转染的ESCs组孵化率显著低于其他2组(P<0.01);PCR检测结果显示,有四只嵌合体鸡的部分器官表达了EGFP基因,其中两只鸡的性腺发生EGFP基因的嵌合。表明赤道面开窗后,对受体鸡胚下腔显微注射经转染的ESCs可以生产嵌合体鸡,产生嵌合体鸡的效率为4.17%。
- 王颖洁张文慧左其生李东张蕾汤贝贝连超肖天荣张亚妮李碧春
- 关键词：开窗法显微注射
- 绵羊的母性行为及其研究进展被引量：1
- 2012年
- 绵羊母性行为表达的差异能够影响羔羊的早期生长发育和存活,在分娩和哺乳期表现出低质量母性行为的母羊很难与羔羊建立起紧密的母-子联系,导致较高的羔羊死亡率。论文就绵羊母性行为表达、生理控制、影响行为表达的因素以及生产管理中的母性行为选择问题作一综述,为在生产实践中加强母性行为选育提供借鉴。
- 王兰萍耿荣庆洪键常洪孙伟张向楠左其生
- 关键词：绵羊母性行为
- 鸡TBX6过表达和干扰载体构建及干扰载体效率检测
- 2023年
- 研究旨在构建TBX6的过表达和干扰载体,为后续研究TXB6在精原干细胞(Sper⁃matogonial stem cells,SSCs)形成过程中的功能奠定基础。通过qRT-PCR检测TBX6在胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)和SSCs的表达水平,根据NCBI上提供的TBX6 CDS区的序列,设计引物扩增目的片段,将其连接到经线性化的慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copG⁃FP-T2A-Puro上,构建TBX6的过表达载体;同时,根据TBX6 CDS区设计三个干扰靶点,在退火后将其连接到经线性化的干扰载体pLVX-shRNA2-puro上,并且进一步将三个干扰载体转染鸡成纤维细胞系(DF-1),观察荧光表达情况并通过qRT-PCR检测其干扰效率。结果显示,TBX6在SSCs上的表达量显著高于ESCs(P<0.05),测序和双酶切验证显示成功构建TBX6过表达及干扰载体;干扰载体转染DF-1细胞后均能稳定表达EGFP荧光蛋白,且shRNA2-TBX6的干扰效果最好。结果表明,TBX6过表达及干扰载体构建成功,且经定量检测后确定shRNA2-TBX6的干扰效果最好。
- 武嵘峰陈欣雨胡菜耿晴晴程富富席一凡左其生张亚妮
- miRNA-31通过靶向Stra8调控鸡SSC减数分裂
- Stra8是在哺乳动物生殖细胞中有丝分裂转变为减数分裂时表达的特异性基因,在哺乳动物和鸟类的减数分裂发生中起关键作用.因此,cSSCs(鸡精原干细胞)中Stra8通路的研究可以更深入地了解鸟-类精子发生.miRNA也是S...
- 王颖洁左其生张文慧何娜娜孙长花张亚妮李碧春
- 关键词：精原干细胞减数分裂
- 卵泡刺激素诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究被引量：4
- 2014年
- 文章探讨了卵泡刺激素(FSH)诱导鸡胚胎干细胞(ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先对FSH的适宜诱导浓度进行筛选,再将传至2代的ESCs,在RA和支持细胞诱导的基础上添加适宜浓度的FSH进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测。筛选出适宜的FSH浓度为25 ng/mL。单独使用FSH诱导,未出现类SSCs样细胞;FSH与支持细胞诱导至第6天出现类胚体,至第12天,出现少量精原样细胞;FSH联合支持细胞和维甲酸(RA)进行诱导,至第2天出现类胚体,第12天出现类SSC样细胞。实时荧光定量PCR结果显示,FSH+支持细胞组、FSH+支持细胞+RA组中,Stra8、integrinβ1、Dazl表达量都持续上调,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下调趋势。添加FSH的诱导组中Stra8的表达量相对于各对照组上调显著。FSH单独诱导不能引起ESCs向雄性生殖细胞分化,但具有促进支持细胞和RA诱导ESCs向雄性生殖细胞分化的作用效果,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础。
- 蒋一秀许厚强左其生张蕾李东施青青张亚妮李碧春
- 关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞分化卵泡刺激素
- 鸡胚成纤维细胞单克隆细胞系的建立
- 目的：本研究旨在建立一套原代鸡胚成纤维细胞(primary stage chicken embryonic fibroblast,pCEF)的单克隆建系方法,以期获得具有高均一度的单克隆细胞系从而解决原代细胞均一度低和培...
- 赵瑞丰靳锴张晨金晶王颖洁左其生张亚妮李碧春
- 关键词：鸡胚成纤维细胞
