刘琳
- 作品数：6 被引量：11H指数：3
- 供职机构：山东农业大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程环境科学与工程更多>>
- 多级逆流固液提取技术提取大豆分离蛋白被引量：3
- 2011年
- 采用液相色谱和生物质谱技术对豆粕中不同蛋白质在提取过程中的释放行为进行了研究,并将多级逆流固液提取技术用于大豆分离蛋白提取.结果表明,豆粕中的2S组分由于分子量低和高水溶性在提取过程中释放速率较快,提取2次总释放量超过80%,3次提取7S和11S组分总释放量约为69%,提高固相和液相间7S和11S的浓度梯度或延长提取时间有助于7S和11S组分释放.采用该提取技术可提高提取液中的总蛋白浓度,在相同蛋白质收率下可节水11%,同时较高的蛋白质浓度可增加酸沉过程中蛋白质收率.
- 高建萍刘琳张贵锋王明林黄永东刘永东苏志国
- 关键词：大豆分离蛋白
- 乳品中明胶快速检测方法研究
- 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和亲和层析技术建立了一种新的牛乳中明胶快速检测方法。基于纤维连接蛋白(FN)可与明胶多肽特异性结合的性质,采用自制偶联FN的亲和柱分离出了牛乳中的明胶多肽,...
- 刘琳冯静马洪梅黄孟军高建萍孔英俊张经华王覃赵新颖王明林张贵锋苏志国
- 关键词：牛乳明胶基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- PEG化rhG-CSF的修饰位点识别研究被引量：4
- 2013年
- 研究聚乙二醇(PEG)修饰的重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)上PEG的偶联位点识别方法。采用聚乙二醇单甲醚琥珀酰亚胺碳酸酯(mPEG-SC 5k)修饰rhG-CSF,利用凝胶过滤法对PEG-rhG-CSF进行分离;采用质谱分析结合胰蛋白酶和糜蛋白酶降解法以及氨基酸组成分析法等技术,研究PEG-rhG-CSF上PEG偶联位点识别方法。胰蛋白酶降解法结合质谱分析结果表明PEG-rhG-CSF酶解产物中N末端多肽T1PLGPASSLPQSFLLK16的残留量为4%,多肽C17LEQVR21的残留量为96%,表明96%的修饰位点发生在N末端的苏氨酸上,4%的修饰位点发生在16位的赖氨酸上,实验采用糜蛋白酶降解法和氨基酸组成分析法进一步测定了PEG修饰位点以及不同修饰位点的比例,与基于胰酶降解和质谱分析法获得的偶联位点结果一致。结论:采用多种方法对PEG-rhG-CSF上PEG偶联位点进行了识别。胰蛋白酶降解法无需对不同修饰位点的PEG-rhG-CSF进行分离,通过多肽含量变化可获得识别修饰位点及比例,HPLC分析过程中多肽分离度对定量结果有影响。胰蛋白酶降解法结合糜蛋白酶降解法直接获得PEG偶联位点信息,但糜蛋白酶降解位点较多,影响方法的通用性。反相色谱法或基于氨基酸组成分析的方法操作过程简单,但准确度较低。
- 李修乐刘琳高建萍张竞孔英俊王明林张贵锋苏志国
- 关键词：聚乙二醇重组粒细胞集落刺激因子质谱酶解
- 基于飞行时间质谱的快速肉类溯源检测方法
- 目的建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的肉类快速溯源检测方法。方法通过采集羊、猪、鸭等市场常售的易混肉品上的血液、肌肉样本进行超声破碎10 min后,离心,提取样本水浸液,进行MALDI...
- 冯静刘琳黄孟军马洪梅高建萍孔英俊张经华王覃赵新颖王明林张贵锋苏志国
- 中药龟甲胶的质量控制方法研究
- 目的：研究龟甲胶酶产物的多肽组成，探索基于特征多肽的龟甲胶质量控制方法;方法：利用液质联用技术结合酶解技术，比较龟甲胶和牛明胶酶解产物的多肽组成，筛选差异性多肽;结果：龟甲胶酶解产物中检测出特征多肽，其对应离子分别为m/...
- 刘琳张贵锋查圣华孔英俊高建萍王明林张宏苏志国
- 关键词：液质联用
- 燕窝酶解产物中多肽的液相色谱质谱分析被引量：4
- 2013年
- 目的:针对燕窝中蛋白质糖基化程度不均一和相对分子质量范围不稳定,以及由此导致的蛋白质难以分离、分析和鉴别的问题,研究1种燕窝中蛋白质和多肽的分析方法。方法:利用分步法从燕窝中提取了蛋白质组分,采用糖苷酶和蛋白酶对蛋白质组分进行了处理,采用生物质谱技术对蛋白质降解物进行了分析,并对其中的多肽进行了序列分析。结果:燕窝中的蛋白提取率为79.7%,采用多级质谱技术从提取蛋白质的糖苷酶和胰蛋白酶处理后的混合物中检测出20种多肽。结论:这些多肽的序列与已有蛋白质数据库中不同种类蛋白的局部序列相似,为富含糖蛋白的动物药成分研究提供了技术参考。
- 刘琳李修乐高建萍孔英俊王明林张贵锋苏志国
- 关键词：糖蛋白酶解质谱分析
