王斌
- 作品数：34 被引量：83H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 通用型猪流感疫苗基础研究
- 引言/目的猪是流感病毒重要的中间宿主和流感病毒的基因"混合器"。对于猪流感的防控不但具有兽医学意义,更具有重要的公共卫生学意义。现行商品化的以某一特定毒株表面蛋白作为主要免疫原所制备的疫苗常因流行毒株的"抗原漂移"或"抗...
- 王斌于海杨馥如黄梦马继红亓文宝周艳君廖明童光志
- 关键词：流感疫苗保护效力免疫保护
- 一株猪捷申病毒的分离鉴定及血清学初步调查被引量：9
- 2011年
- 为了建立猪捷申病毒(PTV)的血清学检测方法,试验根据GenBank中已经登录的PTV基因序列设计了针对VP1基因的引物,将VP1基因经PCR扩增后克隆到真核表达载体pCAGGS中,用重组质粒pCAGGS-VP1转染293T细胞。结果表明:经间接免疫荧光方法验证VP1获得了表达;利用所建立的PTV VP1表达系统对哈尔滨周边地区的575份猪血清样品进行检测,PTV感染的阳性率为60.17%,说明哈尔滨周边地区猪群对PTV的感染率较高。
- 王瑶田志军王斌宫大庆彭金美安同庆倪宏波付世新
- 关键词：猪捷申病毒VP1基因真核表达血清学检测
- 密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗在小鼠体内免疫保护效力研究
- 2012年
- 为了提高甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗的免疫原性,本研究将流感病毒rPan09（HA和NA来自A/California/04/09,其余6个片段来自PR8的重组病毒）的HA基因通过人工合成的方法将其密码子优化为哺乳动物体内偏嗜性密码子opti-HA,同未优化的rPan09的HA基因分别与真核表达载体pCAGGS连接构成重组质粒pCA-optiHA和pCA-HA转染293T细胞,48 h后采用间接免疫荧光的方法检测HA基因的体外表达情况,结果显示重组质粒pCA-optiHA的蛋白表达量明显高于pCA-HA。为评价这两种重组质粒的免疫及保护效力,选取6~8周龄雌性BALB/c小鼠,将质粒pCA-HA、pCA-optiHA以100μg/只的剂量,进行后腿肌肉多点注射,同时设立空载体pCAGGS对照,共免疫3次,每次间隔2周。结果表明DNA疫苗pCA-optiHA可显著提高小鼠的体液免疫和细胞免疫应答水平。三免2周后用107.45EID50的rPan09采用滴鼻方式进行攻毒,用Real-time PCR及制作肺组织石蜡切片检测DNA疫苗的保护效力。结果表明,pCA-optiHA免疫组的保护效力明显高于pCA-HA免疫组。本研究为进一步研究和设计有效的甲型流感病毒DNA疫苗奠定了基础。
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红温峰周艳君童光志
- 关键词：甲型H1N1流感病毒HA基因密码子优化DNA疫苗
- 疱疹病毒与内质网应激被引量：4
- 2021年
- 内质网是分泌型蛋白和膜蛋白折叠及翻译后修饰的主要场所。病毒感染所引起的宿主细胞内环境的改变可使细胞或病毒的未折叠和/或错误折叠蛋白在内质网中大量聚集,使内质网处于生理功能紊乱的应激状态。为了缓解这种应激压力,细胞会启动未折叠蛋白反应(UPR),并通过一系列分子的信号转导维持内质网稳态;同时病毒也会通过对UPR的精密调控营造有利于其复制与增殖的细胞内环境。疱疹病毒是一类有囊膜的DNA病毒,在病毒复制过程中,其表面大量的糖基化囊膜蛋白的合成及成熟依赖于内质网,并由此诱发内质网应激。现将对疱疹病毒感染与内质网应激的最新研究进展做一总结归纳。
- 刘宇婷李国新王斌
- 关键词：内质网应激未折叠蛋白反应疱疹病毒
- 犬细小病毒多重PCR检测方法的建立和临床应用被引量：2
- 2014年
- 犬细小病毒病是由犬细小病毒（Canine paryovir—us，CPV）引起的多发生于幼犬的致死性传染病，主要表现为出血性肠炎和心肌炎。CPV属于细小病毒科细小病毒属猫细小病毒亚群，其基因组为单股负链DNA。该病毒最早由美国学者A．K．Eugster等。
- 李涛王高玲王斌修金生胡崇伟马金友
- 关键词：犬细小病毒病PCR检测方法出血性肠炎心肌炎
- 细胞溶酶体降解A型流感病毒HA蛋白的机制研究被引量：1
- 2019年
- 为研究A型流感病毒HA蛋白在宿主细胞内的降解通路及其机制,本研究首先将表达流感病毒H5亚型HA蛋白的重组质粒和内质网应激通路相关分子XBP1共转染293T细胞,通过检测荧光素酶活性分析HA蛋白引起细胞的内质网应激水平。结果显示HA蛋白在细胞内的表达能够引起内质网应激。进一步进行药物抑制试验,结果显示部分HA蛋白通过溶酶体进行降解。采用RNA干扰、ELISA、药物处理等相关试验对溶酶体降解的3条途径逐一分析,结果显示HA蛋白未通过分子伴侣介导的自噬途径、内吞途径以及巨自噬途径降解。利用表达细胞凝集结构标志蛋白与表达HA蛋白的重组质粒共转染293T细胞,通过观察并经荧光定量,发现HA蛋白在细胞内过表达时发生凝集,随后通过溶酶体降解。本研究结果表明HA蛋白在宿主细胞内错误折叠并诱发内质网应激,错误折叠的蛋白形成凝集结构后通过溶酶体降解。本研究结果初步阐明了HA蛋白通过溶酶体降解的机制,为开发新的抗病毒手段奠定了基础。
- 姚晓雨王斌刘宇婷张晶刘鑫郑永辉
- 关键词：HA蛋白溶酶体降解凝集
- 流行性乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3
- 2010年
- 流行性乙型脑炎病毒(JEV)是一种严重危害人畜健康的虫媒病毒。表面囊膜蛋白(E蛋白)是该病毒的主要结构蛋白。本研究利用原核表达的乙型脑炎病毒SA14-14-2株结构蛋白E蛋白作为免疫原,免疫6周龄BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,经有限稀释法获得1株特异性针对JEV E蛋白的杂交瘤细胞,命名为5D4,经测定5D4单抗亚类属于IgG2a,轻链为κ链。经Western blot证实所得杂交瘤细胞分泌的抗体可特异地与JEV E蛋白结合。结果表明,所制备的抗JEV E蛋白的单抗对病原检测具有很高的特异性,为JEV准确快速的病原诊断和JEV感染相关的基础性研究提供了物质基础。
- 赵付荣华荣虹王斌陈娜莎阿合买提.买买提步志高
- 关键词：乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究
- 引言H1亚型猪流感(swine influenza,SI)是由隶属于正粘病毒科A型流感病毒属的猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)引起的猪呼吸道疾病,是目前危害全世界养猪业的重要呼吸道疾病之一...
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 关键词：免疫保护效力猪流感病毒DNA
- 文献传递
- 中国大陆猪流感病毒流行特征及未来值得关注的几个问题被引量：3
- 2012年
- 控制猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)的流行具有重要的兽医学和公共卫生学意义。中国被认为是国际流感病毒的流行中心,对流感病毒的流行生态有着重要影响。本文将对中国大陆SIV流行特征做一归纳,并简要分析未来值得关注的几个问题。
- 王斌童光志
- 关键词：猪流感病毒
- 通用型猪流感疫苗基础研究
- 目的：研制具有广谱交叉保护能力的通用型猪流感疫苗。方法：将H3亚型SIV HA共有序列进行优化并选取M2e和NP147-155，三者构建DNA疫苗，基因枪免疫小鼠。结果：其中一组只含有HA及M2e的DNA疫苗只能保护动物...
- 王斌于海杨馥如黄梦马继红亓文宝周艳君廖明童光志
- 关键词：免疫保护流感病毒免疫应答
