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郭金萍: 作品数：21 被引量：19H指数：3; 供职机构：第二军医大学基础部更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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慢病毒介导碱性成纤维细胞生长因子在大鼠羊膜上皮细胞中的表达和分泌被引量：2: 2010年; 目的探讨以慢病毒作为载体,将带有分泌肽的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因片段转入大鼠羊膜上皮细胞(AECs)中,构建能稳定表达并分泌bFGF多肽的细胞载体。方法取妊娠晚期SD大鼠的羊膜组织进行AECs原代培养,用免疫荧光细胞化学和RT-PCR法鉴定;构建包含人神经生长因子(NGF)分泌肽-bFGF编码基因的慢病毒载体,并行慢病毒包装,用病毒上清对传代大鼠AECs进行感染并筛选,经免疫荧光细胞化学、RT-PCR及酶联免疫吸附法(ELISA)检测基因转染效果,体外培养观察基因转染后的细胞生长活性;用基因转染细胞的培养上清对PC12细胞进行培养,检测所分泌bFGF多肽的生物学活性。结果所培养的大鼠AECs经鉴定能表达上皮特异性标志物CK-19、神经类细胞标志物巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及细胞多能性标志分子SSEA-4、Oct-4、Nanog、Sox2、波形蛋白(vimentin)等;经感染并筛选后扩增培养的大鼠AECs在mRNA水平及多肽水平均能检测到目的基因bFGF的表达,筛选后的转染细胞生长活性较未转染细胞明显提高,其培养上清能明显促进PC12细胞的生长和分化。结论用慢病毒作为载体能成功将bFGF基因转染入大鼠AECs中,所建立的基因修饰AECs能表达并分泌bFGF多肽,具有较强的生长活性及神经营养活性。; 谢佳芯袁建明郭金萍由振东路长林许家军; 关键词：羊膜上皮细胞碱性成纤维细胞生长因子慢病毒基因转染酶联免疫吸附

组织工程化周围神经移植体及其制备方法: 本发明涉及生物组织工程技术领域，具体涉及一种修复神经缺损移植用的组织工程化周围神经及其制备方法。本发明提供的组织工程化周围神经移植体，其中的种子细胞是以毛囊神经嵴干细胞(NCSC)诱导分化的神经元样细胞和类施万细胞的混合...; 刘芳张传森许家军郭金萍蔺海燕; 文献传递

改善初学体验以培养预选卫生士官学习人体解剖学的兴趣被引量：1: 2017年; 人体解剖学是重要的医学基础课程，也是医学从业人员学习其他医学知识的先导课程。众所周知，初学者对学习解剖学容易产生畏难情绪，影响学习效果。预选卫生士官大多数来自基层，受教育程度不高，基础知识薄弱，学习解剖学课程困难更大。; 潘昌霖郭金萍黄会龙; 关键词：人体解剖学卫生士官预选医学基础课程解剖学课程

组织工程化周围神经移植体及其制备方法: 本发明涉及生物组织工程技术领域，具体涉及一种修复神经缺损移植用的组织工程化周围神经及其制备方法。本发明提供的组织工程化周围神经移植体，其中的种子细胞是以毛囊神经嵴干细胞(NCSC)诱导分化的神经元样细胞和类施万细胞的混合...; 刘芳张传森许家军郭金萍蔺海燕; 文献传递

大鼠受损视神经部分基因表达的变化及移植自体变性腓总神经的影响: 视神经的轴突具有再生能力,但其神经胶质细胞抑制轴突生长的作用很强,致使视神经受损后难以再生。如何诱导神经胶质细胞向有利于视神经再生方向发展,已经受到人们的极大关注。本研究探讨了大鼠视神经受损后巢蛋白(Nestin)、胶质...; 许家军蔺海燕刘芳郭金萍; 关键词：视神经损伤去分化; 文献传递

碱性成纤维细胞生长因子诱导大鼠受损视神经胶质细胞去分化被引量：1: 2010年; 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进大鼠受损视神经修复及诱导胶质细胞去分化的机制。方法成年SD大鼠55只随机分为正常对照组、损伤组、bFGF组。术后7d取眶内段视神经行Agilent基因芯片、实时荧光定量PCR检测;术后7d、14d取眶内段视神经行HE、免疫组织化学等检测。结果术后7d,bFGF组与损伤组相比有645条基因上调,458条下调,其中包括与神经干细胞或前体细胞及神经发育、增殖凋亡、染色质构型、转录调节、信号转导、神经生长相关基因等。与损伤组相比,bFGF组受损视神经远侧段细胞核增大,细胞数量增加,巢蛋白、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性物质增加,近侧段神经丝(NF)阳性物质增加。结论外加bFGF能促进受损视神经细胞增殖,增强神经胶质细胞去分化变化,同时改善神经再生的抑制性微环境,促进视神经再生。; 郭金萍许家军刘芳袁建明; 关键词：视神经碱性成纤维细胞生长因子神经胶质细胞去分化基因芯片

大鼠视神经吸断伤后相关分子表达的变化被引量：10: 2006年; 目的：研究视神经损伤后神经胶质细胞去分化的程度及相关分子的表达。方法：成年雄性大鼠视神经吸断伤后,采用免疫组织化学、原位杂交组织化学结合计算机图像分析,检测视神经巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经纤维丝(NF)以及 Nogo-A mRNA 在伤后3、7、14和28 d 4个不同时相点的表达。结果：视神经伤后,巢蛋白表达上调,在28 d 时表达最高；GFAP 表达先下调,7 d 时最低,随后逐渐上调； MBP 表达上调,呈先上升后降低的趋势；NF 表达呈明显下降趋势；Nogo-A mRNA 表达呈上升趋势,3 d 到7 d 的变化最显著。结论：视神经损伤后相关分子表达提示其神经胶质细胞可去分化为神经前体细胞或神经干细胞,但这些前体细胞或干细胞呈不利于神经再生的状态。; 蔺海燕许家军刘芳郭金萍; 关键词：视神经损伤神经胶质细胞基因表达

大鼠视神经损伤后大胶质细胞去分化及预变性腓总神经的诱导被引量：1: 2008年; 目的研究视神经损伤后神经胶质细胞的去分化及其诱导。方法成年雄性SD大鼠,分为正常对照组、损伤组、移植组和压榨移植组,在视神经伤后3d、7d、14d和28d 4个不同时相点取视神经,用HE方法计数细胞数量,用免疫组织化学、免疫印迹、原位杂交组织化学结合计算机图像分析检测巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经丝(NF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、Nogo-A及Nogo-A mRNA的表达,用免疫荧光双标组织化学法检测Nestin-GFAP和Nestin-MBP的共表达。结果损伤组细胞数量仅在伤后7d明显增多,Nestin、MBP、Nogo-A及其mRNA表达上调,GFAP、NF、BDNF下调,出现一些Nestin-GFAP双标细胞和少量Nestin-MBP双标细胞;与损伤组相比,移植组和压榨移植组一些时相点的细胞数量不同程度地增多,Nestin、GFAP、BDNF和NF表达上调,MBP、Nogo-A及其mRNA表达下调,Nestin-GFAP双标细胞有所增加,且28d组高于14d组。结论视神经损伤后,主要是星形胶质细胞发生去分化,大胶质细胞呈现一些不利于神经再生的基因表达变化;移植预变性周围神经能进一步诱导星形胶质细胞去分化,大胶质细胞的一些基因表达变化有利于神经再生。; 蔺海燕许家军刘芳郭金萍袁建明; 关键词：视神经神经移植神经胶质细胞去分化

视神经再生微环境的调控被引量：6: 2006年; 蔺海燕许家军刘芳郭金萍; 关键词：中枢神经系统损伤中枢神经系统疾病微环境视神经损伤胶质纤维酸性蛋白视网膜节细胞

毛囊神经干细胞促进受损大鼠视神经大胶质细胞去分化被引量：1: 2009年; 目的培养毛囊神经干细胞,研究其对受损视神经大胶质细胞去分化的影响。方法取约90g雄性SD大鼠触须垫毛囊隆突区贴块,无血清培养或经15%胎牛血清诱导培养毛囊隆突区细胞,用免疫荧光细胞化学和PCR鉴定;以含增强型绿色荧光蛋白的腺相关病毒（rAAV2-EGFP）稳定转染该细胞。成年雄性SD大鼠54只,分为正常对照组、损伤组、移植组,移植组为视神经损伤后移植上述毛囊神经干细胞。转染细胞移植组术后7d、14d、30d,取视神经荧光显微镜下观察;损伤组和未转染细胞移植组术后7d取术侧视神经行Affymetrix基因芯片及实时荧光定量PCR检测,术后7d、14d取术侧视神经行HE、免疫组织化学检测。结果成功培养出神经前体细胞标记分子阳性的毛囊神经干细胞,诱导后该细胞可表达成熟神经细胞标记分子。毛囊神经干细胞移植到受损视神经30d后,仍能存活和迁移。与损伤组相比,移植组差异表达基因有240条,其中一些与去分化相关,如干细胞、凋亡、增殖、信号转导、转录、分化发育、细胞黏附等相关基因,实时荧光定量PCR与基因芯片结果基本相符。移植组视神经远侧段细胞数较损伤组明显增多,巢蛋白、髓鞘碱性蛋白（MBP）、细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）表达增加,胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达减少,且视神经近侧段神经丝（NF）表达增加。结论毛囊神经干细胞通过调节受损视神经中的一些基因表达,促进了其大胶质细胞去分化并向有利于神经再生方向变化。; 郭金萍许家军刘芳蔺海燕袁建明谢佳芯; 关键词：视神经去分化基因芯片

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