薛麒 作品数:77 被引量:77 H指数:4 供职机构: 中国兽医药品监察所 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 北京市科技计划项目 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
一种羊痘灭活疫苗及其生产方法 本发明涉及一种羊痘灭活疫苗及其制备方法。本发明采用山羊痘病毒AV41株接种BHK‑21细胞,收获培养物,经浓缩、纯化、BEI灭活后,按一定比例加入适宜佐剂混合乳化制成。用于预防山羊痘和绵羊痘。采用本发明提出的悬浮培养BH... 陈小云 杜吉革 王磊 王静文 张敏 薛麒 朱真产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体大肠杆菌表达条件的优化 被引量:1 2021年 为优化产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的表达条件,以前期构建的产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体为基础,通过控制变量法确定诱导温度、诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导时菌液浓度等原核蛋白表达条件。结果表明,ε毒素的重组突变体在37℃、菌液OD_(600)值为0.895~1.295,1.6 mM IPTG诱导6 h条件下可溶性表达量最高。这为下一步大规模生产ε毒素基因工程亚单位疫苗奠定基础。 朱真 杜吉革 薛麒 李启红 印春生 张莹辉 李倩琳 姚文生 陈小云关键词:产气荚膜梭菌 基因工程亚单位疫苗 蛋白表达 产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价 被引量:4 2018年 为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETXH106P。将GETXH106P克隆至原核表达载体p ET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白r ETXH106P。利用Western blot方法检测r ETXH106P与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将r ETXH106P与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果表明,r ETXH106P为可溶性表达,通过灰度扫描,其可溶性表达量比例可达30%;该重组蛋白能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;细胞毒性试验结果显示,100μg/m L的重组蛋白仍无细胞毒性;小鼠安全性实验结果显示,6.25×106ng/kg剂量的重组蛋白对小鼠仍无致死性;每毫升的一免抗血清可中和450~700个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和3000~4000个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1 MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。以上结果表明,产气荚膜梭菌r ETXH106P重组蛋白毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。 杜吉革 彭小兵 张秀坤 朱真 薛麒 王磊 李启红 印春生 姚文生 康凯 蒋玉文 陈小云关键词:突变 毒力 抗原性 一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法 本发明涉及一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法,本发明制备的无毒性C型肉毒梭菌亚单位疫苗,系采用经过密码子优化、含有麦芽糖蛋白(MBP)标签的肉毒梭菌毒素(BoNTs)重链的无毒区域H<Sub>C</Sub... 陈小云 薛麒 刘莹 李旭妮 杜吉革 李启红 朱真 张莹辉 印春生 姚文生一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法 本发明涉及一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法。本发明将野生型腐败梭菌α毒素成熟毒素的第54位半胱氨酸突变为亮氨酸,第264位天冬酰胺突变为丙氨酸,第269位组氨酸突变为丙氨酸,第310位色氨酸突变为丙氨酸,获得... 陈小云 杜吉革 薛麒 朱真 王磊 印春生 李启红 康凯 姚文生一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白。本发明制备的重组融合蛋白,系采用经过密码子优化、破伤风毒素C片段与诺维梭菌α毒素的C末端以及N端的无毒性抗原表位的重组融合蛋白生产,即最大限度地保留两种毒素蛋白... 杜吉革 刘莹 张莹辉 陈小云 李旭妮 李启红 薛麒 朱真 王磊 印春生 姚文生一种产气荚膜梭菌β毒素重组亚单位疫苗及其生产方法 本发明涉及一种产气荚膜梭菌β毒素重组亚单位疫苗及其生产方法。本发明制备的产气荚膜梭菌β毒素重组亚单位疫苗,系采用经过密码子优化、含有4个氨基酸突变的重组产气荚膜梭菌β毒素蛋白生产,即最大限度地保留天然毒素蛋白的完整性和空... 杜吉革 陈小云 朱真 薛麒 刘莹 印春生 李启红 康凯 姚文生血清4型禽腺病毒和禽戊型肝炎病毒共感染对SPF鸡胚及SPF鸡的致病性分析 2025年 此前有报道曾从不同肝脏损伤病例中鉴定到禽戊型肝炎病毒(aHEV)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的共感染,为进一步观察FAdV和aHEV在鸡体内共感染的致病情况,本研究分别将aHEV-YT和FAdV-4 GY单独或共同感染SPF鸡胚和雏鸡,观察不同感染情况对SPF鸡胚孵化率、雏鸡排毒等方面的差异。结果显示:FAdV-4单感染、aHEV单感染和先后共感染鸡胚后,鸡胚出壳率分别为0、73.30%和40.00%;雏鸡感染实验则显示aHEV-YT单感染1日龄SPF鸡不致死,100 TCID50 FAdV-4 GY单感染对28日龄SPF鸡的死亡率为100.00%,而1日龄先感染aHEV-YT后再感染同等剂量FAdV-4 GY死亡率仅为25.00%。结果表明,aHEV与FAdV-4的共感染相比FAdV-4 GY单独感染均降低了致死率,这为进一步了解两者共感染致病特点与机制提供了一定参考。 侯力丹 迟增娜 张亚文 薛麒 薛麒 吴华伟 吴华伟 赵鹏关键词:禽腺病毒 共感染 SPF鸡胚 SPF鸡 一种羊痘、山羊传染性胸膜肺炎二联灭活疫苗及其生产方法 本发明涉及一种羊痘、山羊传染性胸膜肺炎二联灭活疫苗及其制备方法。本发明采用山羊痘病毒AV41株和山羊支原体山羊肺炎亚种C87001株分别接种悬浮培养的BHK‑21细胞和适宜培养基培养,收获培养物,经浓缩、纯化,分别用BE... 陈小云 王磊 杜吉革 张敏 王静文 朱真 薛麒一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白,即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性,又避免... 杜吉革 刘莹 王磊 陈小云 李旭妮 李启红 朱真 薛麒 张莹辉 姚文生 印春生